تبلیغات
کشاورزی نوین و پایدار - استخراج پرولین از بافت تر گیاهی
 
کشاورزی نوین و پایدار

بر طبق مطالعات محققین مختلف تنش­های غیر زنده خصوصاً خشكی و شوری بر روی متابولیسم ازت در گیاهان تأثیر می­گذارد. نتایج تحقیقات پژوهشگران متعدد حاكی از آن است كه تحت تنش آبی و در گیاهان پژمرده هیدرولیز پروتئین­ها به وقوع می­پیوندد و این موضوع باعث افزایش آمینواسیدها در گیاه  می­گردد.

وقتی كمبود آب شدید باشد، آمینواسیدهای آزاد به خصوص پرولین در بافت­های گیاه جمع می­شوند. میزان اسیدآمینه پرولین آزاد (كه در ساختمان پروتئین شركت ندارد) در گیاهان تحت تنش به طور قابل ملاحظه­ای افزایش می­یابد.

افزایش پرولین در جهت كاهش پتانسیل آبی گیاه به منظور حفظ فشار آماس صورت می­گیرد. پرولین مانند برخی آمینواسیدهای دیگر،­ اسیدهای­آلی، قندها و تركیبات آلی دیگر به عنوان یك تنظیم كننده ­اسمزی[1] در تعدیل شرایط اسمزی سلول ایفای نقش كرده و بدین ترتیب اثرات كمبود آب را خنثی می­كند. ثابت شده است كه افزایش پرولین در نتیجه سنتز جدید آن است و از تجزیه پروتئین حاصل    نمی­شود.


برای پرولین علاوه بر نقشی كه به عنوان تنظیم­كننده اسمزی داراست، اعمال زیر نیز پیشنهاد  شده­اند:

1-    مخزن انرژی برای تنظیم پتانسیل احیای سلولی.

2-    پرولین می تواند مانند یک آنتی اکسیدانت نقش دهنده قوی الکترون  را برای پاکسازی کردن رادیكال­های آزاد ایفا نماید.

3-    محافظت از بزرگ مولكول­هایی مثل پروتئین­ها

4-    كاهش اسیدیته داخل سلول

ذخیره مواد كربنه و ازت­دار برای دوره رفع تنش



[1] Osmoticum

آماده سازی محلول ها:                                           

1.       فسفریك اسید 6 مولار: 12/41 میلی لیتر اسید فسفریك 85% با دانسیته Kg/L ۱/۶۸ به آب مقطر افزوده و سپس به حجم 100 میلی لیتر رسانیده شد.

2.       سولفوسالیسیلیك اسید 3%: 3 گرم پودر سولفوسالیسیلیك اسید را در آب مقطر حل نموده و به حجم 100 میلی‌لیتر رسید.

3.       اسید ناین‌هیدرین: مقدار 25/1 گرم پودر اسید ناین‌هیدرین را در 30 میلی‌لیتر اسید استیك گلاسیال حل نموده و سپس 20 میلی‌لیتر اسید فسفریك 6 مولار آماده‌شده به آن اضافه گردید.

4.       استاندارد 100 میلی­گرم­در­لیتر پرولین: 0100/0 گرم پرولین را در آب مقطر حل نموده و به حجم 100 میلی‌لیتر رسید.

5.       استانداردهای 0, 4, 8 , 12, 16 و 20 میلی­گرم­در­لیتر پرولین: به ترتیب 0, 2, 4, 6, 8 و 10 میلی لیتر از استاندارد 100 میلی­گرم­در­لیتر پرولین برداشته و با آب مقطر به حجم 50 میلی‌لیتر رسانیده شد.

  1. تولوئن.

روش كار:

1.       5/0 گرم مادة تر گیاهی را با هاون خرد شده و درون یك تیوب ریخته شد، سپس 10 میلی‌لیتر سولفوسالیسیلیك اسید 3% آماده‌شده را به آن اضافه نموده و نمونه را درون یخ قرار داده شد.

2.       تیوب را در 15000 دور به مدت 10 تا 15 دقیقه در دمای 4 درجة سانتی‌گراد سانتریفوژ نموده تا مواد اضافی از محلول جدا گردید. می­توان به جای سانتریفیوژ از قیف شیشه­ای و کاغذ صافی برای صاف کردن نمونه ها استفاده کرد .

3.       مقدار 2 میلی‌لیتر از عصارة صاف شده را درون تیوب جدید ریخته و 2 میلی‌لیتر اسید ناین‌هیدرین و 2 میلی‌لیتر اسید استیك گلاسیال به آن افزوده و سپس خوب مخلوط شد.

4.       همزمان مقدار 2 میلی‌لیتر از محلول­های استاندارد صفر، 4، 8، 12، 16 و 20 میلی­گرم ­در ­لیتر پرولین را درون تیوب­های جدید ریخته و 2 میلی‌لیتر اسید ناین‌هیدرین و 2 میلی‌لیتر اسید استیك گلاسیال به آن­ها افزوده و سپس خوب مخلوط شد.

5.       نمونه‌ها را در حمام آب گرم به مدت 1 ساعت حرارت داده و سپس درون حمام یخ قرار داده شد.

6.       مقدار 4 میلی‌لیتر تولوئن به محلول اضافه نموده و آن را به مدت 20 ثانیه با دستگاه ورتكس به هم زده شد.

استانداردهای پرولین محلول در فاز تولوئن را به اندازة لازم در كووت دستگاه اسپكتروفتومتر ریخته و مقدار پرولین را در طول موج 520 نانومتر قرائت كرده و منحنی استاندارد رسم شد. سپس میزان جذب در نمونه های گیاهی را قرائت نموده و با قراردادن آن در معادله خط مقدار پرولین آمد.

توجه: نمونه‌ها و محلول ناین‌هیدرین را در دمای 4 درجة سانتی‌گراد نگهداری شد.

 منابع:

حسیبی، پ.، م. نبی پور و ف. مرادی. 1389. بررسی نقش برخی محافظت کننده های سرمایی در القای تحمل تنش دمای پایین به گیاهچه های برنج. مجله الکترونیک تولید گیاهان زراعی. جلد سوم، شماره اول، بهار 1389. صفحات 39-56

Bates LS, Waldern RP, Tear ID. 1973. Rapid determination of free proline for water stress studies. Plant Soil. 39:205-207.                             

Kramer, P.J. 1969. Plant and Soil water Relationships: A Modern synthesis. McGraw-Hill, Inc. New York.






نوع مطلب :
برچسب ها :
لینک های مرتبط :
دوشنبه 1396/06/13 03:12 ق.ظ
of course like your web-site but you have to check the spelling on several of your
posts. Many of them are rife with spelling problems and I find it
very bothersome to tell the truth on the other hand I will surely come again again.
دوشنبه 1396/05/16 03:43 ق.ظ
No matter if some one searches for his essential thing, thus he/she desires to be available that in detail, therefore that thing is maintained over here.
جمعه 1396/04/16 07:48 ب.ظ
What's up colleagues, pleasant piece of writing and nice urging commented at this place, I am actually
enjoying by these.
پنجشنبه 1396/03/25 08:05 ب.ظ
چلیپا از خود نوشتن در حالی که صدایی
دلنشین در آغاز آیا نه نشستن درست با من پس از برخی از زمان.

جایی در سراسر پاراگراف شما در واقع قادر به من
مؤمن متاسفانه فقط برای بسیار در حالی که کوتاه.
من هنوز مشکل خود را با جهش در مفروضات و یک
خواهد را سادگی به کمک پر کسانی
که شکاف. اگر شما در واقع که می توانید
انجام من را قطعا بود مجذوب.
دوشنبه 1396/02/25 08:23 ب.ظ
I am genuinely happy to glance at this blog posts which contains tons of valuable information, thanks for providing
such information.
دوشنبه 1396/02/25 02:26 ب.ظ
This is my first time pay a visit at here and i am actually happy to read all at alone place.
جمعه 1394/03/8 08:15 ب.ظ
آفرین بر شما مهندس با آرزوی موفقیت های بیشتر
 
لبخندناراحتچشمک
نیشخندبغلسوال
قلبخجالتزبان
ماچتعجبعصبانی
عینکشیطانگریه
خندهقهقههخداحافظ
سبزقهرهورا
دستگلتفکر


آمار وبلاگ
  • کل بازدید :
  • بازدید امروز :
  • بازدید دیروز :
  • بازدید این ماه :
  • بازدید ماه قبل :
  • تعداد نویسندگان :
  • تعداد کل پست ها :
  • آخرین بازدید :
  • آخرین بروز رسانی :